Эрлихиозы (лейкоцитарные риккетсиозы)

Этиология.

Единственным доступным в настоящее время субстратом накопления эрлихий для их изучения и приготовления специфических антигенов являются макрофагоподобные (линия собачьих макрофагов ДН 82) или эпителиоподобные (линия эндотелиальных клеток человека, клетки VERO, HeLa, Л ЭЧ и некоторые другие) перевиваемые клетки эукариотов. Накопление эрлихий в них незначительно, процесс весьма трудоемок и занимает длительное время. Например, при выделении изолятов Е. chaffeensis из крови больных потребовалось выдержать культуры инфицированных клеток ДН 82 в течение 26-39 суток с еженедельной сменой питательной среды, прежде чем был обнаружен рост возбудителя. Последний может быть замечен по цитопатическому эффекту. Трудоемкость культивирования эрлихий и малая доступность культур клеток для клинических лабораторий, вероятно, явились одной из причин редкости (всего 3 изолята для Е. chaffeensis) выделения эрлихий от больных людей.

Для размножения Е. sennetsu, кроме того, могут быть использованы белые мыши, у которых возбудитель вызывает генерализованную инфекцию с накоплением микроорганизма в макрофагах перитонеальной жидкости и в селезенке. Однако он менее удобен, чем культивирование эрлихий в культурах клеток.

Морфологически все виды эрлихий представляют небольшие плеоморфные кокковидные или овоидные микроорганизмы, приобретающие темно-голубой или пурпурный оттенок при окраске по Романовскому - Гимза. Обычно их обнаруживают в вакуолях — фагосомах цитоплазмы инфицированных эукариотических клеток, преимущественно лейкоцитарного ряда, в виде компактных скоплений отдельных частиц паразита, внешне имеющих конфигурацию ягоды тутового дерева; последнее послужило основанием назвать такие скопления морулами. Небольшие цитоплазматические вакуоли клетки-мишени содержат обычно 1-5 эрлихий, но количество инфицированных вакуолей достигало 400 и более на одну клетку (Popov et al, 1995).

При электронно-микроскопическом исследовании установлена сходная с риккетсиями ультраструктура эрлихий и идентичность способа размножения — простым бинарным делением. Особенностью клеточной стенки отдельной частицы, видимой на поперечном срезе, является отставание наружной мембраны от цитоплазматической и ее волнообразный вид, тогда как внутренняя пластина сохраняет гладко-контурированный профиль. По распределению рибосом и фибрилл ДНК эрлихий, в частности, моноцитарного эрлихиоза, представлены морфологически отличающимися двумя типами клеток: 1) с равномерным распределением по цитоплазме-клетки ретикулярного типа; 2) с концентрацией указанных компонентов и уплотнением их в центре клетки. Соответственно, клетки ретикулярного типа имеют размеры 0,4-0,6х 0,7-2,0 цт и напоминают палочки бактерий, тогда как уплотненные клетки находятся в пределах 0,4-0,8г0,6 цт. В процессе бинарного деления замечены оба типа клеток. Предполагается, что клетки ретикулярного типа являются ранней (логарифмической) стадией развития микроорганизма, тогда как уплотненные частицы отражают стационарную фазу жизненного цикла. Наблюдаемый внутри морул фибриллярный материал скорее имеет эрлихиальное происхождение, но его функциональная роль не ясна.

Выход эрлихий осуществляется путем разрыва мембраны морулы-вакуоли и затем клеточной стенки клетки-мишени, либо путем экзоцитоза («выдавливания») эрлихий из морулы, либо морулы целиком из инфицированной клетки (Popov,1996).

Процесс развития эрлихий в организме теплокровных животных практически не изучен.

По своей антигенной композиции эрлихий не имеют общих антигенных сайтов с риккетсиями сыпнотифозной и клещевой группы, а также с С. burnetii и боррелиями Бургдорфера (возбудитель болезни Лайма). Внутри же группы имеют антигенные перекресты с эрлихиями, патогенными для животных, что позволило разделить все известные к настоящему времени эрлихий на три филогенетические группы: геногруппу 1 (Е. canis), геногруппу 2 (Е. equi), геногруппу 3 (Е. sennetsu). Сопоставление эрлихий различных видов и внутри одного вида отдельных изолятов показало, что по сиквенсу гена 16S г RNA, используемого в таксономии микроорганизмов, различие внутри вида не выходит за пределы 1-3 пар оснований (схождение на 100%), тогда как между отдельными видами наблюдается более значительное расхождение. Последнее и используют для дифференциации и идентификации эрлихий. Некоторое различие наблюдается также в содержании иммунодоминантных протеинов клеточной оболочки с различным молекулярным весом (22-28 кДа, 58-120 кДа) при исследовании техникой моноклональных антител с последующим вестернблоттом (Chang et al., 1997). Выпуск коммерческих диагностикумов для индикации эрлихий отсутствует.